ICS65.020.30 CCSB41 DB3212 泰州市地方标准 DB3212/T2100—2025 新型鸭呼肠孤病毒病综合防控技术规范 Technicalspecificationsforcomprehensivepreventionandcontrolof novelduckreovirusdisease 2025-03-27发布 2025-04-27实施 泰州市市场监督管理局 IDB3212/T2100-2025 前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第一部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由江苏农牧科技职业学院提出。 本文件由泰州市农业农村局归口、监督、组织实施。 本文件由江苏农牧科技职业学院负责具体技术内容的解释。 本文件起草单位：江苏农牧科技职业学院、泰州丰达农牧科技有限公司、泰州医药高新技术产业开 发区（泰州市高港区）畜牧兽医站、国家水禽基因库（江苏）、扬州市宝应县望直港镇农业农村局、泰 兴市曲霞镇畜牧兽医站、兴化市畜牧兽医站。 本文件主要起草人：卢会鹏、吕海玲、吴植、程园园、刘凯、邱潇、王安平、谢军、冀恩忠、吴双、 刘莉、朱善元、王健、纪荣超。1DB3212/T2100—2024 新型鸭呼肠孤病毒病综合防控技术规范 1范围 本文件规定了新型鸭呼肠孤病毒病诊断、预防、控制及档案管理。 本文件适用于泰州市内的鸭场新型鸭呼肠孤病毒病的诊断、预防和控制。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB13078饲料卫生标准 GB18596畜禽养殖业污染物排放标准 GB/T36195畜禽粪便无害化处理技术规范 NY/T472绿色食品兽药使用准则 NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 NY/T682畜禽场场区设计技术规范 NY/T1167畜禽场环境质量及卫生控制规范 NY/T3445畜禽养殖场档案规范 NY5027无公害食品畜禽饮用水水质 NY/T5038无公害食品家禽养殖生产管理规范 NY/T5339无公害农产品畜禽防疫准则 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 新型鸭呼肠孤病毒病novelduckreovirusdisease 由新型鸭呼肠孤病毒（novelduckreovirus）引起的以肝、脾表面出现白色坏死灶和出血点为主 要特征的一种免疫抑制性、急性传染病。 4诊断 4.1流行病学 本病的发生无明显季节性，常呈地方性流行。该病毒感染具有明显的年龄依赖性，发病⽇龄主要为 6日龄～25日龄，其中以7日龄居多，病鸭感染后3d～6d是排毒高峰期。病程长短不一，一般为2d~ 14d，在发病后的5d～7d是死亡高峰期，其中2周龄以内患病鸭死亡率最高。该病的传播途径以消化道 和呼吸道为主，也可通过母源垂直传播。 4.2临床症状 鸭患新型鸭呼肠孤病毒病后表现为精神萎靡不振、食欲减退、排黄白色稀粪、呼吸有啰音、软脚和 关节肿大，部分病鸭表现为瘸腿、站立不稳等神经运动功能失调症状，病死鸭可见角弓反张。雏鸭表现 为发病日龄越小，病死率和死亡率越高；耐过鸭生长发育缓慢、体重下降。病程约5d～7d，发病率为 5%～32.5%，病死率为4%～20%。DB3212/T2100-2025 24.3病理变化 本病可引起雏鸭体内多种组织器官发生病变，剖检可见肝脏肿大、表面有不规则出血灶和坏死灶； 脾脏肿大、有坏死点和出血点；肾脏表现为出血水肿。显微病变表现为脾淋巴细胞减少、组织细胞坏死 形成坏死灶；肾小管上皮细胞变性并与基底膜脱离；法氏囊粘膜下出血，淋巴滤泡和淋巴细胞减少等。 其中，脾脏坏死、肝脏不规则出血和坏死是本病最具特征性的病变。 4.4实验室诊断 4.4.1病料采集与处理 按NY/T541要求无菌采集发病鸭的脾脏1g～2g，加入10倍体积生理盐水，用剪刀剪碎后，置于 研磨器中充分研磨，反复冻融2次～3次，12000×g离心10分钟，取上清液100μL用于RNA提取。 按RNA提取试剂盒提取RNA，提取的RNA按反转录试剂盒说明书反转录为DNA，用于实时荧光定量PCR 检测，否则应置于-70℃冻存备用。 4.4.2实时荧光定量PCR检测 4.4.2.1引物及探针的设计 引物及探针的基因序列设计如下： ——上游引物F：5′-GCTAGATGTGAATCGCATAACGA-3′； ——下游引物R：5′-GCCATAAAGGAAGCAGAAGCA-3′； ——探针P：5′NED-TGACGTTGCTATGGTAACTCCTTCTGCTG-BHQ2-3′； 4.4.2.2反应体系与反应条件 荧光定量PCR反应体系25μL：2×PremixExTaq（ProbeqPCR）12.5μL，50×ROXReference Dye0.5μL，DNA模板1μL，上、下游引物（10pmol/μL）各0.4μL，探针（10pmol/μL）为0.3 μL，灭菌超纯水补足25μL。反应条件：95℃30s，95℃5s，60℃30s；40个循环。 4.4.3PCR检测结果的判定 当阳性对照样品NDRV出现典型的S型扩增曲线，空白对照样品和阴性对照样品均无扩增曲线出现， 本次实验结果有效。若待检样品的Ct值小于或等于35，且具有典型S型扩增曲线则判定为检测阳性； 若待检样品Ct值大于35，或无典型S型扩增曲线则判定为检测阴性。 4.5结果判断 4.5.1符合4.1、4.2和4.3的，临床诊断为疑似新型鸭呼肠孤病毒。 4.5.2符合结果判定4.5.1，且符合4.5.2时，可确诊为新型鸭呼肠孤病毒。 5预防 5.1引种管理 不应从疫区引进种蛋和种鸭。从外地引种时，应取得原产地动物卫生监督机构的检疫合格证明。到 达引入地后，种鸭应隔离饲养30d以上，经隔离观察合格后方可混群饲养，引种检疫应符合《跨省调运 种禽产地检疫规程》要求。 5.2免疫接种 对鸭使用呼肠孤病毒病疫苗进行免疫，所用疫苗必须是经农业农村部批准使用的疫苗。 5.3饲养管理 5.3.1规模鸭场应符合《动物防疫条件审查办法》规定的防疫条件。DB3212/T2100—2024 35.3.2饲养方式和各生长阶段鸭的饲养密度应按照NY/T5038的要求。 5.3.3养殖场环境质量及卫生控制规范应符合NY/T1167的要求。 5.3.4生产用水的使用符合卫生标准的自来水厂水或井水；以及饲料应无霉变、无杂质，应符合GB 13078的要求。 5.4生物安全管理 舍养或放养鸭清空后，空舍或者空场14d以上，可饲养下一批新鸭。非流动的活动水域应更换新水 或进行有效消毒后，可饲养下一批新鸭。 5.5消毒措施 5.5.1空舍消毒 已经清场的空舍，对墙裙和地面等非易燃物品可用火焰喷射器进行火焰消毒，对水泥地面和墙壁可 用2%氢氧化钠溶液喷洒消毒，笼具等工具及屋顶可用过氧乙酸、碘制剂等进行清洗消毒。清洗消毒2 次～3次，每次间隔24h。清洗消毒后，再用甲醛密闭熏蒸消毒24h以上。 5.5.2带鸭消毒 选用0.2%～0.3%的过氧乙酸进行带鸭喷雾消毒，消毒时间宜选择在有阳光、相对温暖的中午，但 有呼吸道疾病时不宜带鸭喷雾消毒。平时预防可每周消毒1次～2次，发病时可每2d～3d消毒1次。 5.5.3运动场、水域消毒 运动场采用消毒液喷洒，定期更换消毒剂类型；人工水域和天然水域可使用卤素类消毒剂消毒，全 池均匀泼洒，夏季每周1次，冬季每月1次。 5.5.4人员消毒 饲养人员和管理人员在进入生产区之前，进行洗澡、更衣；饲养人员和管理人员的衣物采取紫外线 照射等方法消毒，若被污染后，采取浸泡、高压灭菌等方法消毒。 5.5.5车辆工具消毒 进入生产区的车辆用腐蚀性小的消毒药（如：新洁尔灭、洗必泰和过氧乙酸等）进行喷洒消毒，车 辆通过装有有效消毒液的消毒池进入。日常生产过程中常用工具应定期采用日晒、消毒液喷洒或浸泡等 方式进行消毒。 6控制 6.1疫情报告 发现患病或疑似患病时，应立即向所在地农业农村主管部门或者动物疫病预防控制机构报告。 6.2隔离患病鸭群 所有鸭应控制移动，不应离开饲养场，防止动物疫情扩散。立即将患病的鸭群由单独人员进行隔离 饲养，饲养人员进出饲养场地时换衣换鞋，避免交叉感染。 6.3全场紧急消毒 对于可能接触的用具、设备、鸭舍、道路及其它建筑进行彻底的消毒清洗，消灭或隔离苍蝇、蚊虫 等传播媒介，用具应每天清洗消毒。 6.4治疗措施 为降低死亡率可采取敏感抗菌药防止细菌继发感染，同时在饮水中加入多种维生素和葡萄糖等进行 辅助治疗，兽药的使用应按照NY/T472的规定使用。 6.5无害化处理DB3212/T2100-2025 4对病死鸭应进行无害化处理，按照《病死及病害动物无害化处理技术规范》的规定执行；粪便及其 它被污染物品，按GB/T36195进行无害化处理；养殖污染物的排放按GB18596要求进行。 6.6疫情暴发流行 当暴发流行时，依照《中华人民共和国动物防疫法》和《重大动物疫情应急条例》进行处理。 7档案管理 应做好家禽来源、日常生产管理、消毒和用药、病历和出场检疫等记录，同时建立生产养殖档案。 按NY/T3445的规定：生产管理档案保存期不少于2年，种禽档案保存期应不少于5年。