ICS65.020.30 CCSB43 21 辽宁省地方标准 DB21/T3920—2024 辽西驴鲜精人工授精技术规程 TechnicalregulationofLiaoxidonkeyartificialinseminationwithfreshsemen 2024-01-30发布 2024-03-01实施 辽宁省市场监督管理局  发布DB21/T3920—2024 I前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布单位不承担识别专利的责任。 本文件由辽宁省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：辽宁农业职业技术学院、辽宁省现代农业生产基地建设工程中心、建平县芮林牧 业有限公司。 本文件主要起草人：孙亚波、于明、鄂禄祥、徐晓江、韩迪、刘衍芬、丁剑峰、赵红秋、孙成学、 王春艳、孙淑琴、杨秋凤、单铁军。 本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈， 我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。 归口管理部门通讯地址：辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：024-23447862。 文件起草单位通讯地址：辽宁农业职业技术学院（辽宁省营口市经济技术开发区熊岳镇育才里76- 0号），联系电话：0417-7020543；辽宁省现代农业生产基地建设工程中心（沈阳市皇姑区陵园街7-1号） 联系电话：024-22893780；建平县芮林牧业有限公司（辽宁省建平县深井镇三元井村）联系电话： 13704212682。DB21/T3920—2024 1辽西驴鲜精人工授精技术规程 1范围 本文件规定了辽西驴母驴发情鉴定、公驴采精、精液品质检查与稀释、输精、早期妊娠诊断等技术 要求。 本文件适用于辽西驴的人工授精技术操作，其他驴可参照执行。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 NY/T1335牛人工授精技术规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 人工授精artificialinsemination 采用人工方法利用器具采取公驴精液，并将检查处理后的精液输入发情母驴生殖道内，使其妊娠的 技术。 3.2 发情周期estruscycle 母驴从一次发情开始到下一次发情开始间隔的时间，一般为18d～25d，平均为21d。 3.3 发情鉴定estrusdetection 通过适当方法判定母驴发情程度的方法。 3.4 精子活率spermmotility 公驴精液中直线前进运动的精子数占总精子数的百分率。 3.5DB21/T3920—2024 2精子密度spermconcentration 1mL公驴精液中的精子数量。 4母驴发情鉴定 4.1外部观察法 母驴出现阴门肿胀、叭嗒嘴、头低垂、耳后抿、频繁排尿，主动接近或追赶公驴的现象，鉴定为发 情。每天观察次数不少于2次。 4.2阴道检查法 阴道黏膜由白色变为粉红色，初期有少量稀薄粘液、后期粘液变稠，子宫颈口出现充血、肿胀、松 弛、开张的现象，鉴定为发情。 4.3直肠检查法 4.3.1卵泡出现期 卵巢一侧有卵泡出现，体积1cm～2cm，弹性较强，无波动，排卵窝很深。此时母驴发情1d～2 d。 4.3.2卵泡发育期 卵泡体积增大，约为3cm～4cm，卵泡液增多，卵泡稍有波动，排卵窝由深变浅。此时母驴发 情2d～3d。 4.3.3卵泡成熟期 卵泡体积增至5cm～6cm，弹力减弱，波动明显，似熟透的柿子，有一触即破的感觉。此时母 驴发情3d～5d。 4.3.4排卵期 卵泡壁变薄，卵泡液逐渐流失，有两层皮感觉。此时母驴发情5d～6d，是输精的最佳时期。 4.4试情法 将母驴转向试情公驴的头部，观察母驴的表现。如母驴有主动靠近公驴、举尾、张开后肢、频繁排 尿等表现，可鉴定为发情。如未发情，则母驴躲避或踢咬公驴。 5采精 5.1公驴的选择DB21/T3920—2024 3采精公驴应符合辽西驴种用特征，体质健康、年龄2.5岁～10岁。 5.2器材和用品准备 5.2.1器材 假阴道、集精杯、显微镜、载玻片、玻璃棒、恒温水浴锅、温度计、无菌纱布、注射器、长臂手套 等。 5.2.2用品 0.1%高锰酸钾消毒液、0.1%新洁尔灭、75%酒精、碘酊、葡萄糖、生理盐水、蒸馏水、柠檬酸钠、 卵黄等。 5.3器具清洗和消毒 凡接触精液和驴生殖器的各种器具均清洗和消毒。按照NY/T1335执行。 5.4假阴道使用前处理 安装好的假阴道消毒、注水及润滑：用75%酒精擦拭内胎，酒精挥发后用生理盐水冲洗2次～3 次；注入相当于假阴道容积2/3的38℃～40℃温水；自假阴道内胎边缘向内涂抹凡士林，涂抹深度不 超过整个内胎长度的三分之一。 5.5采精台畜的准备 选择性情温顺、体格适当、健康的发情母驴（或采精假台畜）作为台畜，以备公驴爬跨。将发情 母驴牵引到采精栏内保定，将尾巴固定在身体一侧，用0.1%的新洁尔灭擦拭母驴外阴，再用温生理盐 水冲洗、擦干；或将发情母驴生殖道分泌物涂在采精假台畜后躯臀部。 5.6采精公驴准备 5.6.1生殖器的清洗按摩 先用温开水冲洗包皮和勃起的阴茎，再用温生理盐水冲洗、擦干，按摩阴囊10s。 5.6.2空爬增强性欲 先使公驴空爬（假爬跨）2次～3次，以增强性欲和射精量。当阴茎充分勃起并排出少量分泌物 时，即准备采精。 5.7采精 5.7.1采精操作DB21/T3920—2024 4采精员在母驴后躯的一侧，用手横握假阴道。当公驴爬跨到母驴身上时，迅速用另一手取下遮盖假 阴道口的纱布、托起公驴包皮将阴茎导入假阴道内，假阴道与地面角度呈35°为宜。迅速用一手握假 阴道、另一手扶住集精杯，待公驴射精后从台畜身体滑下时，采精员打开假阴道上的放气阀、顺势取下 假阴道并竖起，放出空气和三分之一的温水。 5.7.2采精频率 每周采精4d～5d，每天1次~2次。 6精液品质检查与稀释 6.1过滤 先将灭菌烧杯置于31℃温水中水浴，再用4层灭菌纱布盖住杯口，将精液由集精杯倒入烧杯内，过 滤掉副性腺胶状物。 6.2精液检查 6.2.1外观检查 辽西驴精液的正常颜色呈乳白色或灰白色，无味或略有腥味。用注射器吸取精液测定射精量，辽 西驴射精量一般为50mL～100mL。 6.2.2显微镜检查 室温18℃～25℃，将精液放置在37.5℃的恒温载物台上，在400倍～600倍的显微镜下 检查，精液应呈翻滚的云雾状。要求精子活率不低于60%，精子畸形率不超过20%。 6.2.3精子密度 利用精子密度仪测定，要求达到1.5×108个/mL以上。 6.3精液稀释 6.3.1常用稀释液 稀释液配方1：葡萄糖7g，蒸馏水100mL，水浴煮沸30min，冷却至28℃后加入青霉素和链霉 素粉剂各80万IU，在3ｈ内使用。 稀释液配方2：柠檬酸钠1.4g,葡萄糖3.0g,青霉素粉剂80万IU～100万IU,链霉素80万IU,新 鲜卵黄8mL～10mL,蒸馏水100mL，在3h内使用。 6.3.2稀释