ICS 65.020.20 B 62 黑 龙 DB23 江 省 地 方 标 准 DB23/T 2629—2020 尖叶石竹组培苗生产技术规程 2020-05-28 发布 黑龙江省市场监督管理局 2020-06-27 实施 发 布 DB23/T 2629—2020 前 言 本标准依据 GB/T 1.1-2009 的编写规则起草。 本标准由黑龙江省农业农村厅提出。 本标准由黑龙江省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：东北农业大学、哈尔滨圭璜科技有限公司。 本标准主要起草人：王金刚、周爱民、张琦、杨涛、曲波、杨雅涵、刘恩慧、乔坤、龚束芳。 I DB23/T 2629—2020 尖叶石竹组培苗生产技术规程 1 范围 本标准规定尖叶石竹（Dianthus spiculifolius Schur）组培苗生产的环境与设备消毒、培养基配 制、外植体制备、初代培养、继代培养、壮苗培养、生根培养、培养条件、移栽及生产档案。 本标准适用于尖叶石竹的组培苗生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6001-1985 育苗技术规程 LY/T 1882-2010 林木组织培养育苗技术规程 NY/T 2306-2013 花卉种苗组培快繁技术规程 3 环境与设备消毒 3.1 接种室消毒 接种室消毒按 NY/T 2306-2013 中 8.6 进行。 3.2 培养室消毒 培养室消毒按 NY/T 2306-2013 中 8.7 进行。 3.3 超净工作台消毒 超净工作台消毒按 NY/T 2306-2013 中 8.5、8.6 进行。 3.4 接种器具消毒 接种器具按 NY/T 2306-2013 中 8.4 进行。 4 培养基配制 4.1 母液配制 培养基母液配制按NY/T 2306-2013 中7.3执行。 4.2 4.2.1 培养基配制 培养基配方 培养基配制成分如下： 1 DB23/T 2629—2020 a) 初代培养基：MS＋蔗糖30g/L＋琼脂粉8g/L，pH值5.8； b) 继代增殖培养基：MS＋0.2mg/L 6-BA＋4mg/L KT＋0.02mg/L IAA＋蔗糖30g/L＋琼脂粉8g/L， pH值5.8； c) 生根培养基：1/2 MS＋1.0mg/L IBA＋0.01mg/L NAA＋蔗糖30g/L＋琼脂粉8g/L，pH值5.8。 4.2.2 培养基配制方法 培养基配制方法按NY/T 2306-2013中7.4执行。 4.3 培养基灭菌及保存 培养基灭菌及保存方法按 LY/T 1882-2010 中 4.2 进行。 5 外植体制备 5.1 外植体选择 选取当年生的嫩茎作为外植体，宜晴天进行。 5.2 外植体消毒 外植体的处理：选取生长良好的茎段，自来水冲洗 3h，75% 酒精中浸泡消毒 5s，2%次氯酸钠消毒 3min，再用蒸馏水冲洗 4～5 次，用滤纸吸干水分。 6 初代培养 将消毒后的外植体切成 1cm～2cm 的茎段，每段至少带有 1 个～2 个叶芽，将切好的外植体接种到 诱导培养基中，注明接种物名称和日期，培养 21d～28d，记录诱导情况。 7 继代培养 分化的不定芽接入继代增殖培养基中，约 8 个/瓶，培养 28d～35d，每个茎段萌发出 5 个～8 个不 定芽，分割新长出的不定芽，可按需求重复继代。 8 壮苗培养 切取继代增殖培养中长 1.0cm 以上的不定芽，转接至壮苗培养基中，约 8 个/瓶，培养 14d～21d。 9 生根培养 壮苗培养基中组培苗长到 2.0cm 以上高度时，将小苗转入生根培养基中，约 10 株/瓶，培养 7d～ 10d，当小苗基部长出健壮的不定根 3 条以上，大部分苗根长为 0.5cm～2.0cm 时，即可进行移栽。 10 培养条件 无菌培养室白天的温度控制在23±2℃，夜间不低于15℃，相对空气湿度控制在60%～80%，光照强 度为2000Lux～3000Lux，光照时间为12h/d～14h/d，黑暗时间为10h/d～12h/d。 2 DB23/T 2629—2020 11 11.1 移栽 移栽基质的制备 基质选择草炭土和蛭石混合，体积比约为1:1，栽植前用0.5%的高锰酸钾溶液浇透消毒24h。 11.2 驯化移栽 将生根培养瓶转移到过渡培养间，半开瓶口1d～2d后，敞开瓶口炼苗2d～3d后可移栽。 11.3 组培苗移栽 将幼苗取出, 用清水洗净附着在根上的培养基,用清水喷湿,可进行移栽，移栽后压实小苗周围的基 质，浇透水，覆70%遮阳网。 11.4 移栽苗管理 保证温室内幼苗水分供需平衡，育苗水分管理按GB/T 6001中执行。移栽5d～7d后，去掉遮阳网， 浇1/2 MS营养液1次，温度22℃～28℃，相对空气湿度60%～80%，温室环境应保持清洁。 12 生产档案 建立尖叶石竹组织苗生产技术档案，包括繁殖培养条件、培养基配制、外植体接种、增殖数量、种 苗驯化移栽及管理等。 3