ICS 67 X 04 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB 13/T 5189.3—2020 天然植物提取物中危害成分检测 第 3 部分：正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇 和乙醇 5 种有机溶剂残留的测定 2020 - 06 - 28 发布 河北省市场监督管理局 2020 - 07 - 28 实施 发 布 DB13/T 5189.3—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 DB13/T 5189《天然植物提取物中危害成分的检测》共分12个部分： ——第 1 部分：亚硝酸盐的测定； ——第 2 部分：二氧化硫的测定； ——第 3 部分：正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇和乙醇 5 种有机溶剂残留的测定； ——第 4 部分：辣椒提取物中砷、铅、镉、铬、汞的测定； ——第 5 部分：万寿菊提取物中对氧基苯胺的测定； ——第 6 部分：万寿菊提取物中乙氧基喹啉的测定； ——第 7 部分：天然番茄红中苯并[α ]芘的测定； ——第 8 部分：辣椒提取物中苏丹红的测定； ——第 9 部分：辣椒提取物中叔丁基对苯二酚的测定； ——第 10 部分：辣椒红中赭曲霉毒素 A 的测定； ——第 11 部分：叶黄素中苯的测定； ——第 12 部分：甜菊糖苷中邻苯二甲酸酯的测定。 本部分为DB13/T 5189第3部分。 本标准由河北省市场监督管理局提出。 本部分起草单位：河北省食品检验研究院、晨光生物科技集团股份有限公司、石家庄海关技术中 心、清河县食品药品检验检测中心。 本部分主要起草人：张岩、刘蓓蕾、刘宇辉、张会军、张婧雯、李松松、何美。 I DB13/T 5189.3—2020 天然植物提取物中危害成分检测第 3 部分：正己烷、丙酮、乙酸乙 酯、甲醇和乙醇 5 种有机溶剂残留的测定 1 范围 本部分规定了天然植物提取物中正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇和乙醇5种有机溶剂残留的测定方 法。 本部分适用于天然植物提取物中5种有机溶剂残留的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 原理 天然植物提取物中的溶剂残留通过顶空进样器加热后变成气态游离出来，经过顶空进样器进入气 相色谱系统分离，采用氢火焰离子化检测器进行检测，外标法定量。 4 试剂或材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 4.1 二甲基甲酰胺：色谱纯。 4.2 标准品 正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇，纯度大于99.0 %，0℃～4℃避光保存，有效期6个月。 4.3 标准储备液：分别称取正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇标准品（4.2）0.01 g、0.1 g、0.2 g、0.2 g、0.5 g（精确至 0.1 mg）于 100 mL 容量瓶中加二甲基甲酰胺溶解，并稀释至刻度，摇匀， 浓度分别为：100 μ g/mL、1000 μ g/mL、2000 μ g/mL、2000 μ g/mL、5000 μ g/mL，0℃～4℃避光保 存，有效期 3 个月。 4.4 混合标准工作液：取 1mL 标准储备液（4.3）于 10 mL 容量瓶中加二甲基甲酰胺溶解，并稀释至 刻度，摇匀，配制成正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇浓度分别为：10 μ g/mL、100 μ g/mL、200 μ g/mL、200 μ g/mL、500 μ g/mL 的混合标准工作液，0℃～4℃避光保存，有效期 1 个月。 5 仪器和设备 5.1 气相色谱仪：配氢火焰离子检测器。 5.2 顶空进样器。 1 DB13/T 5189.3—2020 5.3 分析天平：感量 0.1 mg。 5.4 超声波清洗器。 5.5 顶空瓶：20 mL，带铝质盖及聚四氟乙烯膜硅橡胶垫。 6 分析步骤 6.1 提取 称取植物提取物样品0.5 g（精确至0.1 mg）于20 mL顶空瓶中，准确加入5 mL二甲基甲酰胺，加盖 密封，混匀，超声提取1 min，待上机分析。 6.2 测定 6.2.1 顶空条件 具体参考顶空条件如下： a) 顶空瓶温度：80℃； b) 定量环温度：90℃； c) 传输线温度：100℃； d) 顶空瓶平衡时间：10 min； e) 气相循环时间：25 min。 6.2.2 色谱条件 具体参考色谱条件如下： a) 色谱柱：HP-INNOWAX（柱长为 30 m，柱内径为 0.25 mm，膜厚度为 0.25 µm），或其它等效的 色谱柱； b) 载气：氮气； c) 载气流量：3.0 mL/min； d) 进样口温度：190℃； e) 程序升温条件：35℃，保持 3 min，每分钟以 3.5℃升至 65℃，再以 20℃升至 220℃，保持 5 min； f) 检测器温度：235℃； g) 进样体积：1 mL； h) 分流比：10:1。 6.2.3 测定 根据样品中残留有机溶剂的含量情况，选定面积相近的混合标准工作溶液，混合标准工作溶液和 样液中的有机溶剂响应在仪器的检测线性范围内。取样液和混合标准工作液分别进样，其标准溶液的 参考色谱图参见附录A中的图A.1。 6.2.4 空白试验 除不加试样外，均按上述测定条件和步骤进行。 7 试验结果 2 DB13/T 5189.3—2020 试样中待测组分（正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇和乙醇）的含量Xi按式（1）计算。 Xi  Ai  CSTi  V ………………………………………………（1） ASTi  m 式中： Xi --试样中各个有机溶剂残留组分的浓度，单位为毫克每千克（mg/kg）； Ai--试样中各个有机溶剂残留组分在仪器上的响应峰面积； CSTi --标准工作液中各个有机溶剂残留组分的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V --提取溶液的体积，单位为毫升（mL）； m --用于测定的试样质量，单位为克（g）； ASTi --标准工作液中各个有机溶剂残留组分在仪器上的响应峰面积。 计算结果需扣除空白值，计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示， 保留三位有效数字。 8 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %。 9 检出限和定量限 当取0.5 g样品时，正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇和乙醇的检出限分别为0.3 mg/kg、3 mg/kg、6 mg/kg、6 mg/kg和15 mg/kg；定量限分别为1 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg、20 mg/kg和50 mg/kg。 3 DB13/T 5189.3—2020 附 录 A （资料性附录） 标准溶液色谱图 正己烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇和乙醇标准溶液色谱图，如图A.1所示。 正己烷 pA 乙酸乙酯 乙醇 13 丙酮 12 11 甲醇 10 9 8 7 6 1 2 3 4 5 6 图A.1 5种标准溶剂的色谱图 _________________________________ 4 7 8 min