ICS 65.150 B 52 DB32 江 苏 省 地 方 标 准 DB32/T 3801—2020 中华仙影海葵人工繁殖技术规范 Technical regulation for the artificial reproduction of Cereus sinensis Verrill 2020 - 05 - 25 发布 江苏省市场监督管理局 2020 - 06 - 25 实施 发 布 DB32/T 3801—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由江苏省农业农村厅提出并归口。 本标准起草单位：江苏省海洋水产研究所。 本标准主要起草人：吴建平、杨海萍、张志勇、刘海林、王储庆、高波、孙瑞健、祝斐。 I DB32/T 3801—2020 中华仙影海葵人工繁殖技术规范 1 范围 本标准规定了中华仙影海葵（Cereus sinensis Verrill）人工繁殖的繁殖设施、育苗饵料、亲体培育、 育苗管理和记录。 本标准适用于中华仙影海葵的人工繁殖。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 3097—1997 海水水质标准 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 亲体培育 parent rearing 通过将中华仙影海葵父本和母本进行人工培育使其成熟用于繁殖的活动。 3.2 浮浪幼虫 planula 腔肠动物受精卵完成胚胎发育从卵内孵化出的幼虫，营浮游生活的阶段。 3.3 幼海葵 juvenal anemone 浮浪幼虫附着变态为小海葵至出苗前的阶段。 4 繁殖设施 4.1 环境条件 繁殖设施应设在拥有交通和电力设施、自然海水易获取的地点，海水水质符合 GB 3097 规定，配 备沙滤设施。 1 DB32/T 3801—2020 4.2 育苗室 育苗室采用玻璃钢顶或尼龙膜顶，加盖透光率 50％的遮阳网，育苗室墙壁设置窗户便于通风。 4.3 育苗池 4.3.1 规格 方形或圆形水泥池，面积 5 m2 ～10 m2，深度 1.2 m，池底坡度 1：20，配套进排水设施。 4.3.2 清洗消毒 新建池须经 3 个月以上反复浸泡冲洗，保证池水 pH 在 7.8～8.2。消毒后加入沙滤海水。海水适宜 温度 26℃～30℃, 适宜盐度 26‰～30‰。 4.3.3 亲体培育槽 4.3.3.1 沙底质培育 性成熟前采用平底培育槽，培育槽底部铺设过筛去除杂质并经暴晒清洗的细建筑黄沙，铺沙厚度为 40 cm，沙面以上水位60 cm～80 cm，水质应符合GB 3097第一类水质的要求。 4.3.3.2 无底质培育 育苗前移入无底质水槽中培养待产。采用锥底培育槽，水槽上部设置20目水平隔网，隔网上方水位 60cm～80cm。 4.3.4 充气 每平方米设置 200 目金刚砂制散气石 1～2 个，连续充气。 4.4 集卵网箱 用 150 目筛绢网制作集卵网箱，安放时集卵网箱置于集卵水槽中，网箱高度应高出水槽上口 20 cm， 集卵水箱上口位置低于亲体培育槽底部位置。 4.5 附着器 采用 PE 塑料波纹板作为附苗板，附苗板规格 40 cm×40 cm，附苗板插入聚乙烯附苗架中制成附着 器。附苗板间距 3 cm～4 cm。附着器样式参见附录 A。 5 育苗饵料 饵料种类包括小球藻、贝类担轮幼虫、轮虫、卤虫幼体、挠足类和糠虾。 6 亲体培育 6.1 亲体采集 每年春夏采集自然海区网捕或人工挖掘的中华仙影海葵作为亲体。 6.2 亲体选择 亲体应选择触手齐全，口盘、柱体、足盘无伤，个体重量大于 100 g 的成体。 6.3 运输 采用聚乙烯薄膜袋充氧运输，每袋加入海水量为薄膜袋容量的五分之一，亲体装运重量应不超过海 水重量的二分之一，时间控制在8 h以内。 2 DB32/T 3801—2020 6.4 亲体投放 每年 3 月～7 月投放亲体至沙底培育槽，亲体投放密度为 100 头/m2，让海葵自主潜入沙中，次日 淘汰未能潜沙个体。自然水温培育。 6.5 投饵 壳长4 cm左右的鲜活海产双壳贝类，现场剥取完整贝肉。每头海葵傍晚喂贝肉一颗，投喂时用镊子 或其他夹具夹持贝肉，将贝肉轻碰海葵触手，待海葵抓握住后松开夹具。水温14℃以下不投喂，14℃～ 20℃之间每3天投喂1次，20℃以上每天投喂1次，可根据摄食情况调整。 6.6 移槽 每日凌晨移除残饵及消化残余物，全部换水，检查记录摄食情况，观察性腺发育变化和产卵行为。 水温自然上升至24℃以上后，取出沙底质培育槽中亲体，轻柔冲洗后，移入无底质培育槽水平网上培育 待产。移槽时操作应轻缓，避免亲体受伤。 7 育苗管理 7.1 集卵 亲体开始产卵后，每天排水时用集卵网箱收集受精卵。集卵水箱中先注满海水，将亲体培育槽中含 受精卵的水全部导入集卵网箱，水自集卵水箱上口溢出，受精卵集中于集卵网箱中。集卵时控制缓慢流 水，避免受精卵受到损伤。体积法计数。 7.2 受精卵孵化 7.2.1 培育用水 育苗池加入沙滤海水 60 cm，添加 EDTA 二钠 5 mg/L。 7.2.2 单细胞藻类 加入小球藻至水体中密度为 8×104 cell /ml～10×104 cell /ml。 7.2.3 受精卵投放 将收集的受精卵放入育苗池，受精卵投放密度 3×105 ind/m3～5×105 ind/m3。 7.2.4 孵化管理 胚胎发育期每天加水 10 cm。自然温度下受精卵 36 h 左右完成胚胎发育，进入浮浪幼虫幼虫期。用 光学显微镜观察胚胎发育进程，2 h 取样一次，检查细胞分裂及分化发育情况。 7.3 浮浪幼虫培育 7.3.1 投饵 浮浪幼虫第一日用贝类担轮幼虫为饵料，第二日开始添加轮虫，第三日开始添加卤虫无节幼体。每 天投饵三次，投饵量参照附录 B，可根据浮浪幼虫摄食及饵料剩余情况进行调整。 7.3.2 附苗器投放 浮浪幼虫培育 4 d 后，向育苗池中投放附苗器，投放时使附苗板处于水平方向，用系绳吊挂使附苗 器距离池底 15 cm～20 cm，投放数量为 6 个/m2 左右。附苗密度以 3000ind/m2～5000ind/m2 为宜。 7.3.3 换水 每天换水 2 次，每次换水 50%。 3 DB32/T 3801—2020 7.4 幼海葵培育 7.4.1 饵料 每天投饵 1 次，投饵量参见附录 B，可根据幼海葵摄食及饵料剩余情况进行调整。 7.4.2 换水 每天换水 2 次，每次换水 50％。 7.4.3 倒池 幼海葵培育每 3 d～5 d 倒池一次，将附苗器捞出后放入培育池，全部附苗器捞出后排干池水，检查 池底和池壁，将从附苗器脱落的幼海葵集中放入其他池培育。 7.5 出苗 幼海葵生长发育达到 24 触手或口盘直径达到 5 mm 时即可出苗。出苗时捞出附苗器，取下附苗板， 用塑料板小心刮下附苗板上的幼海葵，体积法或逐个计数。 8 记录 做好育苗记录。记录保存 2 年以上。 4 DB32/T 3801—2020 附 录 A （资料性附录） 附着器 A.1 附着器 图 A.1 附着器 5 DB32/T 3801—2020 附 录 B （资料性附录） 投饵量参考值 B.1 投饵量参考值见表 B.1 表 B.1 投饵量参考值 发育阶段 担轮幼虫 轮虫 卤虫无节幼体 第二日 10 1 第三日 10 3 8 触手 10 5 3 16 触手 5 5 1 24 触手 5 5 2 第一日 浮浪幼虫 幼海葵 （单位：ind /mL ） 挠足类 糠虾 15 _________________________________ 6