ICS 65.150.  B 52          吉 DB22 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 3194—2020       鲤浮肿病防疫技术规范 Technical specification for carp edema virus disease prevention 2020 - 11 - 23 发布  吉林省市场监督管理厅 2020 - 12 - 30 实施 发 布 DB22/T 3194—2020 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则  第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：吉林农业大学。 本文件主要起草人：周井祥、王秋举、王好、袁海延、张瑞雪、曲桂娟、刘艳辉、王茁宇、梁杰、 燕宝安。 I DB22/T 3194—2020 鲤浮肿病防疫技术规范 1 范围 本文件规定了鲤浮肿病的病原、临床症状、病理变化、流行特征、诊断、预防、防控措施和尾水处 理等技术要求。 本文件适用于对鲤浮肿病的诊断、预防和控制。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 11607 渔业水质标准 NY 5071 无公害食品 渔用药物使用准则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 鲤浮肿病 carp edema virus disease 由鲤浮肿病毒（Carp edema virus, CEV）感染引发的病毒性疾病。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CEV: 鲤浮肿病毒（Carp Edema Virus） CEVD:鲤浮肿病（Carp Edema Virus Disease） 5 病原 病原为 CEV，是一种线性的、双链DNA病毒，该病毒在电镜下类似桑葚形，有囊膜，大小约在 200 nm ×400 nm。 6 6.1 临床症状 典型症状 主要表现为： a) 鱼体浮肿； 1 DB22/T 3194—2020 b) 昏睡； c) 烂鳃：鳃丝溃烂、出血、肿胀、坏死并产生大量黏液。 6.2 非典型症状 主要表现为： a) 体表糜烂、出血、皮下组织水肿，出现大量灰白色粘液； b) 眼球凹陷。 7 病理变化 典型 CEVD 病鱼病理切片可见：鳃细胞水肿、重度增生、鳃小片黏连，有大量异质炎性细胞浸润， 上皮细胞呈空泡状；肾脏出血、坏死，大量炎性细胞浸润；肠道出血。 8 流行特征 8.1 感染品种及特征 8.1.1 8.1.2 8.2 CEV 主要感染鲤属鱼类，各生长阶段均感染。 鲫携带 CEV，无临床症状。 发病水温 7 ℃～28 ℃ 均可发病，水温 7 ℃～9 ℃ 和 15 ℃～25 ℃ 该病易爆发。 8.3 诱因 水质恶化、药物刺激、缺氧和气泡病、过量投喂、拉网操作等。 8.4 危害 患病鱼死亡迅速，从出现临床症状到死亡只有 24 小时～48 小时；发病持续时间短（一般 7 天～ 10 天），死亡率可高达 80%～100%。 9 诊断 通过观察典型症状（参照 6 临床症状）进行临床诊断。必要时，可采用下列方法进一步确诊： a) 组织病理诊断：取鲤鳃和肾脏及肠道组织进行组织病理切片镜检观察（参照 7 病理变化）； c) 透射电镜诊断：可在透射电子显微镜下通过观察鳃组织中的成熟病毒粒子进行诊断； d) 分子生物学诊断： 1) 套式 PCR：采用套式 PCR（Nest-PCR）进行诊断若为阳性则可确诊, Nest-PCR 引物见规 范性附录表 A.1； 2) 荧光定量 PCR：若为阴性且疑似 CEVD 则采取荧光定量 PCR（qPCR）进行联合诊断, qPCR 引物见规范性附录表 A.2。 10 预防 2 DB22/T 3194—2020 10.1 消毒 10.1.1 生产工具消毒 养殖者应自备网具和运输工具，杜绝外借，生产工具使用后用氯制剂按每立方米 50 克～100 克, 浸泡 6 小时以上。 10.1.2 清塘消毒 放养前池塘应用生石灰等彻底消毒，带水清塘：每立方米 200 克～250 克。 10.1.3 水体消毒 消毒所用渔药应符合 NY 5071 的要求。 10.2 苗种检疫 禁止从疫区或者疾病高发地区购买苗种，在苗种的调运与投放之前应做好对病原的检疫。 10.3 预防病死鱼传染 将病死鱼带离养殖区做无害化处理。 10.4 控制该病毒病的诱发因素 10.4.1 预防水质变化 养鱼水质应符合 GB 11607 的规定。根据不同类型的养殖水体情况，选择适时改底、补肥、补菌、 增氧等稳水措施。保持整个养殖过程的水体稳定。 10.4.2 规范用药 在发病高峰期禁止使用刺激性大的杀虫剂、消毒剂、抗生素等药物。 10.4.3 合理增氧曝气 实时开增氧机增氧，预防池塘严重缺氧和发生气泡病。 10.4.4 减少生产操作 在该病的流行发病高峰期应减少拉网，尽量一次性拉网卖出所有存塘鱼，不要并塘，更不能并塘后 高密度存塘。 10.5 养殖用水管理 在春季将越冬后的池塘老绿水质进行改良，把水位加深到 1.8 米～2 米； 10.6 增强体质 投喂增强体质的药物，并控制投饲量，按正常投喂量 60%～70% 投饲。 10.7 及早诊断 养殖鲤出现疑似 CEVD 症状（参照 6 临床症状）时，应及时送相关单位进行检测诊断。 3 DB22/T 3194—2020 11 防控措施 确诊后，应遵循“三停一开” 的原则，即停投饲、停用药、停操作，多开增氧机。不要大量换水， 尽量避免使鱼产生应激反应，加重病情。 12 尾水处理 对感染 CEV 的水体应经消毒处理方可排出，可每立方米采用氯制剂 10 克～15 克,30 分钟～60 分钟。 _________________________________ 4 DB22/T 3194—2020 AA     附 录 A （规范性附录） 相关 PCR 引物 表A.1 Nest-PCR 引物 PCR 方法 引物名称 序列(5’ – 3’) 片段大小 Oyamatsu nest-1 Oyamatsu-F GCTGTTGCA ACCATTTGAGA 548bp Oyamatsu-R TGCAGGTTGCTCCTAATCCT Oyamatsu-nF GCTGCTGCACTTTTAGGA GG Oyamatsu-nR TGC AAGTTATTTCGATGCCA CEFAS_F ATG GAG TAT CCA AAG TAC TTA G CEFAS_R CTC TTC ACT ATT GTG ACT TTG CEFAS_nF GTT ATC AAT GAA ATT TGT GTA TTG CEFAS_nR TAG CAA AGT ACT ACC TCA TCC Oyamatsu nest-2 CEFAS nest-1 CEFAS nest-2 表A.2 PCR 方法 CEFAS qPCR Oyamatsu qPCR 180bp 528bp 478bp qPCR 引物 引物名称 序列 (5’ – 3’) CEFAS-qF AGT TTT GTA KAT TGT AGC ATT TCC CEFAS-qR GAT TCC TCA AGG AGT TDC AGT AAA CEFAS-q-Probe [FAM] AGA GTT TGT TTC TTG CCA TAC AAA CT [BHQ1] Oyamatsu-qF1 TTTAGGAGGACAAGTAAAGTTACCA Oyamatsu-qR1 GCAAGTTATTTGATGCCAACC Oyamatsu-q-Probe [FAM]CCAGCTCCTACAAGGAAAGCAATGA [BHQ1] B   5