ICS 65.020.30 B 44 DB12 天 津 市 地 方 标 准 DB12/T 974—2020 奶牛性控冻精人工授精技术规范 Regulation about artificial insemination with sex-sorted semen in dairy cattle 2020 - 09 - 30 发布 天津市市场监督管理委员会 2020 - 11 - 01 实施 发 布 DB12/T 974—2020 前 言 本标准依据GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由天津市农业农村委员会提出并归口。 本标准起草单位：天津市畜牧兽医研究所。 本标准主要起草人：马毅、陈丽丽、赵康、姚大为、赵庆彬、刘景喜、韩克元、尹春博。 I DB12/T 974—2020 奶牛性控冻精人工授精技术规范 1 范围 本标准规定了奶牛性控冻精人工授精的方法和规范。 本标准适用于应用性控冻精对母牛进行人工授精的奶牛场、奶牛养殖小区及奶牛养殖户等。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4143 牛冷冻精液 NY/T 1335-2007 牛人工授精技术规程 3 术语与定义 NY/T 1335-2007界定的以及下列术语和定义适用于本文件，为方便使用，以下重复列出了某些术语 和定义。 3.1 性控冻精 sex-controlled cryogen 对公牛所产生的精液，通过人为方法将X、Y精子进行科学分离，将分离后的X精子进行分装冷冻制 成的细管冻精。 3.2 发情周期 oestrus cycle 一次发情开始至下一次发情开始之前一天所间隔的时期。 3.3 人工授精 artificial insemination 用人工方法采取公牛精液，经检查处理后，输入发情母牛生殖道内，使其受胎的技术。 [NY/T 1335-2007，定义3.3] 3.4 发情鉴定 estrus detection 判断母畜是否发情和确定适时配种的技术。 [NY/T 1335-2007，定义3.4] 4 适用对象 达到适配标准的育成牛，初配月龄在13～15月龄之间，体重达380kg以上，体高124cm以上；健康， 膘情适中的经产牛。 1 DB12/T 974—2020 5 发情鉴定 5.1 外部观察 通过母牛的外部表现症状和生殖器官的变化判断母牛是否发情和发情程度，见附录A。 5.2 直肠检查 通过直肠检查卵巢，触摸卵泡发育程度，判断发情程度及排卵时间，见附录A。 5.3 活动量监测 利用计步器或其他电子监测装置监测牛的活动量来判断发情牛。发情牛表现为活动量增加，并伴有 5.1所描述的全部或部分特征。 6 输精准备 6.1 输精器具清洗和消毒 6.1.1 凡是接触精液和母牛生殖道的输精用器具都应进行清洗和消毒。 6.1.2 玻璃器皿使用前用水浸泡和洗涤。若有污物用加洗涤剂的温水或重铬酸钾洗液浸泡数小时后， 用水洗净晾干，放置在电热鼓风干燥箱 160℃烘烤 1h，冷却备用。 6.1.3 金属器械洗净后，放置于电热鼓风干燥箱 120℃烘烤 1h，自然冷却备用。 6.1.4 输精用的橡胶、塑料品用高压蒸汽消毒灭菌，或用浓度为 75%的酒精消毒。 6.2 冷冻精液的贮存 冷冻精液应浸泡在液氮生物容器中贮存，包装好的冷冻精液由一个液氮容器转换到另一液氮容器 时，在液氮容器外停留时间不得超过5s。 6.3 冷冻精液解冻 冷冻精液的解冻方法应符合GB 4143的要求。 6.4 精液品质要求 精液质量应符合GB 4143的要求，解冻后活力达到0.4以上。 6.5 牛体卫生 输精前，用手掏净母牛直肠宿粪后，再用温水清洗母牛外阴部并擦拭干净。 7 输精 7.1 输精时间 7.1.1 相比应用常规冻精配种的输精时间向后推迟 3h～4h，见 NY/T 1335-2007 中 7.1。 7.1.2 母牛活动量开始增加，并表现出 5.1 所描述的特征后 10h～16h 左右输精。 7.2 性控精液准备 2 DB12/T 974—2020 剪去性控精液封口，剪口应正，断面应齐。将剪去封口的细管精液迅速装入输精器管内，步骤为： 剪去封口端的为前端，输精器推杆后退，细管装至管内，输精器管进入塑料外套管，管口顶紧外套管中 固定圈，输精器管前推到头，外套管后部与输精器后部螺纹处拧紧，全部结合要紧密。 7.3 输精方法 使用直肠把握输精法，输精人员一手五指并握，呈圆锥形从肛门伸进直肠，动作要轻柔，在直肠内 触摸并把握住子宫颈，使子宫颈把握在手掌之中，另一手将输精器从阴道下口斜上方约45°角向里轻轻 插入，双手配合，输精器头对准子宫颈口，轻轻旋转插进，过子宫颈口螺旋状皱壁1cm～2cm即可到达输 精部位。一头母牛应使用一支输精器或者一支消毒塑料输精外套管。直肠把握输精使用器械及其操作分 为： a) 用球式玻璃输精器的，注入精液前略后退约 0.5cm，手捏橡胶头注入精液，输精管抽出前不得 松开橡胶头，以免回吸精液； b) 用金属输精器的，注入精液前略后退约 0.5cm，把输精器推杆缓缓向前推，通过细管中棉塞向 前注入精液。 7.4 输精部位 越过子宫颈和子宫角分叉处，排卵侧子宫角。 8 妊娠诊断 8.1 外部观察 妊娠母牛外部表现发情周期停止，食欲增进，毛色润泽，性情变温和，行为变安稳。怀孕中后期腹 围增大，腹壁一侧突出，甚至可观察到胎动，乳房胀大。 8.2 直肠检查 输精后二个情期未发情（40天左右），通过直肠触摸检查子宫，可查出两侧子宫角不对称，孕侧子 宫角较另侧略大，且柔软。60天后直肠触摸可查出妊娠子宫增大、胎儿和胎膜。直肠触摸同侧卵巢较另 侧略大，并有妊娠黄体，黄体质柔软、丰满，顶端能触感突起物。 8.3 超声波诊断 用B超检查母牛的子宫及胎儿、胎动、胎心博动等，最佳检测时间为29天～31天，检查时发现一个 或是数个圆形或椭圆形的、规则分布的无回声暗区，或是在没有回声的暗区内有胚胎出现即可判断为怀 孕。 9 数据记录 输精后，应做好繁殖及育种等相关数据记录，记录内容包括母牛号、配种日期、与配公牛号或性控 冻精号、配种员、妊检日期及妊检结果，格式参见附录B。 3 DB12/T 974—2020 AA 附 录 A （规范性附录） 发情外部表现症状和生殖器官的变化 表A.1 发情外部表现症状和生殖器官的变化 期别 发情初期（不接受爬跨期） 母牛兴奋不安，牟叫，游走，采 外观表现 食渐少，奶牛产奶量降低，追逐、 爬跨它牛，而它牛爬跨不予接 受，一爬即跑 发情盛期（接受爬跨期） 母牛游走减少，它牛爬跨时站立不 动、后肢张开，频频举尾，接受爬 跨 发情末期（拒绝爬跨期） 母牛转入平静，它牛爬跨时，臂 部避开，但很少奔跑 阴户肿胀、松弛、充血、发亮， 子宫颈口红润开张，阴道壁充血， 黏液量减少，混浊黏稠。子宫颈 生殖器官变化 卵泡变化 子宫颈口微张，有稀薄透明黏液 黏液显著增加，流出大量透明而黏 口紧闭，有少量浓稠黏液。阴唇 流出，阴道壁潮红 稠的分泌物 消肿起皱、尾根紧贴阴门 一侧卵巢增大卵泡直径 0.5cm～ 卵泡增大，波动明显，泡壁由厚 1.0cm 变薄 卵巢变软，光滑，有时略有增大 4 DB12/T 974—2020 BB 附 录 B （资料性附录） 配种妊检记录表 表B.1 配种妊检记录表 序号 母牛号 配种日期 与配公牛号/ 性控冻精号 配种员 妊检日期 妊检结果 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 _________________________________ 5