(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210844671.0 (22)申请日 2022.07.19 (71)申请人 宁夏大学 地址 750021 宁夏回族自治区银川市西夏 区贺兰山西路489号 (72)发明人 孙悦　李芮芮　张军翔　张芳　 (51)Int.Cl. C12Q 1/04(2006.01) C12M 1/34(2006.01) C12M 1/00(2006.01) (54)发明名称 一种微生物在双层培养基上显色的方法 (57)摘要 本公开提供了一种微生物在双层培养基上 显色的方法， 属于微生物技术领域。 该方法包括 提供微生物培养器， 微生物培养器包括底壳、 隔 板架和顶盖， 隔板架位于底壳内， 隔板架将底壳 内腔分隔为多个子腔室， 隔板架靠近底壳底面的 一侧设有开槽， 在垂直于底壳底面方向上， 隔板 设有刻度； 将下层培养基倒入微生物培养器中， 使得下层培养基通过开槽于各个子腔室内流通； 分次取不同的菌悬液， 并将所取菌悬液一一对应 地接种于 各子腔室的下层培养层上进行培养； 向 各个子腔室中倒入上层培养基； 继续培养， 观察 各菌落的生长情况。 该方法减少菌的相互污染， 能节省大量的培养基和常规培养皿， 节约大量的 时间， 提高工作效率， 减少平行实验误差 。 权利要求书2页 说明书7页 附图5页 CN 114958957 A 2022.08.30 CN 114958957 A 1.一种微 生物在双层培养基上显色的方法， 其特 征在于， 包括： 提供微生物培养器， 所述微生物培养器包括底壳、 隔板架和顶盖， 所述底壳为顶端开口 的壳体， 所述隔板架 位于所述底壳内， 所述隔板架将所述底壳内腔分 隔为多个子腔室， 所述 隔板架的侧 边缘与所述底壳的侧壁相 抵， 所述隔板架的底边与所述底壳的底面相 抵， 所述 隔板架靠近所述底壳底面的一侧设有开槽， 所述多个子腔室通过所述开槽相互贯通， 在垂 直于所述底壳底面方向上， 所述隔板设有刻度， 所述顶盖用于 盖合于所述底壳； 将下层培养基倒入所述微生物培养器中， 使得所述下层培养基通过所述开槽于各个所 述子腔室内流通， 以铺 满各个所述子腔室的底部， 冷却凝固形成下层培养层， 所述下层培养 层的高度高于所述 开槽的高度； 分次取不同的菌悬液， 并将所取菌悬液一一对应地接种于各所述子腔室的所述下层培 养层上进行培 养； 培养完成后， 向各个所述子腔室中倒入上层培养基， 冷却凝固形成上层培养层， 所述上 层培养基中含有显色剂； 继续培养， 观察各菌落的生长情况。 2.根据权利要求1所述的微生物在双层培养基上显色的方法， 其特征在于， 所述开槽的 宽度为10 ‑20mm， 所述开槽的高度为3 ‑6mm； 所述下层培 养层的高度比所述 开槽的高度高0.5 ‑1.5mm。 3.根据权利要求1所述的微生物在双层培养基上显色的方法， 其特征在于， 所述隔板架 由至少两个隔板交叉 组合而成， 位于任意相 邻两个所述子腔室之 间的隔板的靠近所述底壳 底面的一侧均设有所述 开槽； 在将下层培养基倒入所述微生物培养器中， 以及向各个所述子腔室中倒入上层培养基 时， 可通过所述隔板架上的刻度调整 各个子腔室内形成的所述下层培养层以及上层培养层 的高度。 4.根据权利要求1所述的微生物在双层培养基上显色的方法， 其特征在于， 所述下层培 养层的厚度和所述上层培 养层的厚度之差不超过1m m。 5.根据权利要求1所述的微生物在双层培养基上显色的方法， 其特征在于， 所述菌悬液 属于酵母菌； 所述菌悬 液在所述下层培 养层上的培 养温度为28℃， 培 养时间为1 ‑3d； 在形成所述上层培 养层后的培 养温度为28℃， 培 养时间为2 ‑3h。 6.根据权利要求5所述的微生物在双层培养基上显色的方法， 其特征在于， 所述下层培 养基的材 料包括蛋白胨10.0  g/L， 葡萄糖20.0  g/L， 酵母 浸出粉5.0  g/L， 琼脂14.0  g/L； 所述上层培养基的材料包括葡萄糖： 0.5  g/L， 琼脂15.0  g/L， 2,3,5 ‑氯化三苯基四氮 唑0.5 g/L。 7.根据权利要求6所述的微生物在双层培养基上显色的方法， 其特征在于， 所述观察各 菌落的生长情况包括： 观察各个菌落显色情况， 根据菌落呈现的颜色判断菌株的生理特性。 8.根据权利要求1所述的微生物在双层培养基上显色的方法， 其特征在于， 所述隔板架 包括至少一个第一隔板和至少一个第二隔板， 所述第一隔板为沿第一方向延伸的长方形 板， 所述第二隔板为沿第二方向延伸的长方 形板， 所述第一方向和所述第二方向垂直；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114958957 A 2当所述第一隔板数量 不少于两个时， 多个所述第一隔板沿所述第二方向间隔排列； 当所述第二隔板数量 不少于两个时， 多个所述第二隔板沿所述第一方向间隔排列； 各个所述子腔室之间的体积之差不超过3 0%。 9.根据权利要求1所述的微生物在双层培养基上显色的方法， 其特征在于， 所述隔板架 的高度小于所述底壳的高度。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114958957 A 3