本文是学习GB-T 26619-2011 斑节对虾. 而整理的学习笔记,分享出来希望更多人受益,如果存在侵权请及时联系我们
本标准规定了斑节对虾(Penaeus
monodon)的主要形态特征、生长与繁殖特性、遗传学特性以及检 测方法。
本标准适用于斑节对虾种质的检测和鉴定。
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
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GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分:染色体组型分析
GB/T 19782 中国对虾
下列术语和定义适用于本标准。
3.1
体长 body length
眼柄基部或额角基部眼眶缘到尾节末端的长度。
3.2
头胸甲长 carapace length
眼窝后缘连线中央到头胸甲中线后缘的长度。
斑节对虾 Penaeus mondon Fabricius,1798。
节肢动物门(Arthropoda), 甲壳纲(Crustacea),十足目(Decapoda), 对虾科(Penaeidae),对虾属
(Penaeus)。
体表光滑,壳稍厚,体色由暗绿色、深棕色和浅黄色横斑相间排列,构成腹部鲜艳斑纹。腹部游泳足
浅蓝色,原肢前面黄色,其缘毛桃红色,第2、3颚足外肢刚毛桃红色。斑节对虾的外部形态见图1。
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图 1 斑节对虾外部形态
GB/T 26619—2011
额角较平直,末端较粗,稍向上弯,伸至第1触角柄末端,上缘具7齿~8齿,胃上刺与第1齿距离
较大,约为第2齿至第3齿距离的2倍;额角后脊伸至头胸甲后缘附近。额角侧脊较低而钝,伸至胃上
刺下方。头胸甲具眼眶触角沟、颈沟。额角侧沟较深,伸至胃上刺下方。额角后脊中央沟明显,但较浅
而窄,断续后伸。无额胃沟。肝脊较宽而钝,前半水平伸,后部稍低。眼胃脊约占头胸甲眼眶缘与肝刺
间距离的后部2/5。头胸甲具触角刺、肝刺、胃上刺。眼眶角圆形。前侧角圆无颊刺;腹部第4节中部
至第6节背中央具纵脊。第6节长为高的1.1倍。尾节稍长于第6节,末端尖,无侧缘刺。对虾头胸甲
分区情况参见附录 A。
第1触角柄刺伸至第1节中部,外缘末端刺较小,内侧附肢伸至柄第1节末或稍超出,第1触角鞭
较短,下鞭约为头胸甲的2/3,上鞭梢短于下鞭,上鞭基部较粗部分约占鞭长的1/3。第2触角鳞片超出
第1触角柄末端。第3额足伸至第1触角柄第3节末端(成体雄性),雌性及幼雄性伸至柄第1节末端,
雄性指节几乎与掌节等长,接于掌的近末端1/5处,掌末有丛毛。雌性者指为掌长的1/2~1/3。
第1步足伸至或稍超出第2触角柄腕末端。第3步足最长,伸至第1触角柄末,或以指节超出之。
第5步足伸至第2触角柄第1节中部。第1步足有基节刺和座节刺,第2步足仅有基节刺。第1步足
至第4步足具外肢,第5步足无外肢(对虾外形、体节、附肢情况参见附录 A)。
背中叶末端突小,半圆形,侧叶较宽,顶端较圆;明显地超出中叶之外,末部有雏形小齿。斑节对虾
雄性交接器见图2。
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雄性交接器背面
图 2
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雄性交接器腹而
斑节对虾雄性交接器
style="width:1.91333in;height:3.2065in" />
雄性交接器侧面
略呈梯形,长为最大宽的近2倍,末半部较窄,基部较宽,边缘着生硬刺。斑节对虾雄性附肢见图3。
style="width:3.54in;height:4.33994in" />
图 3 斑节对虾雄性附肢
GB/T 26619—2011
第4步足间有一粗大的钙化隆起,边缘密生较长的刚毛,形似花冠,后有1端突与纳精囊前中央纵
裂口相接。纳精囊盘状,宽大于长,约为长的1.2倍,中央纵行的开口边缘厚大成唇。斑节对虾雌性交
接器见图4。
style="width:5.00005in;height:5.18012in" />
图 4 斑节对虾雌性交接器
5.5.1 第1触鞭较长,约为头胸甲长的2/3。
5.5.2 眼胃脊约占头胸甲眼眶缘与肝刺间距离的后部2/5。
5.5.3 第6节长为高的1 . 1倍。
5.5.4 尾节稍长于第6节。
5.5.5 第1触角鞭下鞭约为头胸甲的2/3,上鞭基部较粗部分约占鞭长的1/3。
额角齿式7~8/2~3,以7/3者较多。
在天然水域中雄虾寿命一般为1年~1.5年,雌虾寿命大约2年。
斑节对虾南海西北部水域野生群体的体长与体重关系见式(1)、式(2):
雌虾:W=1.1274×10⁻ 5L³.0411 (r=0.9953,n=52) (1)
雄虾:W=7.6366×10-⁶L³.1151 (r=0.9815,n=48) (2)
式中:
W— 体重,单位为克(g);
L—— 体长,单位为毫米(mm)。
不同日龄养殖斑节对虾的体长、体重实测值参见附录 B。
斑节对虾第1次性成熟的最小个体体长为189 mm, 最小体重95 g。
斑节对虾的繁殖期较长,7月至第二年2月均为繁殖产卵期。卵子分批发育成熟,分次产出。
GB/T 26619—2011
斑节对虾的怀卵量因个体大小而异,为109×10¹粒/尾~211.8×10¹粒/尾,平均154×10⁴粒,产
卵量30×10⁴粒~100×10 粒。
斑节对虾卵呈球形,黄绿色,稍透明,卵径0.27 mm~0.31mm, 平均0.29 mm。
在静止水中,卵慢
慢下沉池底。卵裂的方式为全均等分裂。
斑节对虾的染色体数目为2n=88。
斑节对虾成体肌肉中乳酸脱氢酶(LDH)
同工酶的电泳图谱见图5,表现为一条酶带。
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图 5 斑节对虾成体肌肉中LDH 同工酶电泳图谱
斑节对虾三亚种群和纳颉岛种群的平均杂合度分别是0.3596和0.3254,厦门养殖群体的多态位
点比例 P 为61.96%,预期杂合度 H。 为0.151,观察杂合度 H。 为0.120。
长度测量用直尺,精确到1 mm。
长度测量用直尺,精确到1mm,
重量(湿重)采用吸水纸吸去体表水分后再用托盘扭力天平称重,精确到
0.1g, 所得到的数据用Excel进行统计与回归分析,体重与体长的关系应用W=aL°
模型进行拟合。
用天平或杆秤称产卵前、后雌性亲虾的重量,前后两次称重之差即为产卵的重量。用电子天平称刚
产出的卵1.0 g 左右,在解剖镜下计数,平行两次,平均值为卵密度(粒/g)。
产卵量按式(3)计算:
G=(W₁-W₂)(n₁/2w₁+n₂/2w₂) …… ………………… (3)
式中:
G— 产卵量,单位为粒;
W₁—— 产卵前亲虾重量,单位为克(g);
W₂— 产卵后亲虾重量,单位为克(g);
m₁—— 试样1的卵粒数,单位为粒;
w—— 试样1重量,单位为克(g);
n₂——试样2的卵粒数,单位为粒;
w 样2——试样1重量,单位为克(g)。
取雄性斑节对虾,在其腹部1、2节间侧注射秋水仙素溶液(浓度按1.5μg/g
体重),注射完毕后在
水族箱中暂养4 h~6h, 取出解剖,获取其精巢,用0.7%氯化钾(KCl)
低渗,卡诺氏(Carony's) 液固定,
GB/T
气干法制片,吉姆萨(Gimsa)
染色,镜检,选择分散良好的染色体计数。计数方法按 GB/T
规定执行。
26619—2011
18654.12 的
取肌肉组织加入5倍体积的0.05 mol/L 磷酸盐缓冲液(pH7.0) (配制方法见附录
C) 冰浴匀浆, 14000 r/min下,4℃离心15 min,
取上清液与甘油-溴酚蓝加样缓冲液(配制方法见附录 C) 混合,立即
电泳或-20℃保存,24 h 内200 V 电泳12 h, 采 用TG
缓冲系统,缓冲液的配制见附录C 。 电泳采用垂
直板聚丙烯酰胺凝胶电泳,分离胶和浓缩胶的浓度分别为7.5%和2.5%,染色液的配制按GB/T19782
的规定执行。
群体遗传学特征中,三亚种群和纳颉岛群体的数据是对30尾样品的肌肉和肝胰腺两种组织中的苹
果酸酶(ME) 、苹果酸脱氢酶(MDH) 、 谷氨酸脱氢酶(GDH) 、 乳酸脱氢酶(LDH)
、 磷酸葡萄糖变位酶 (PGM) 、碱性磷酸酶(ALP) 、 酸性磷酸酶(ACP) 、
超氧化物歧化酶(SOD) 和酯酶(EST)9 种同工酶的检
测结果。厦门养殖群体的数据是对40尾样品的肌肉和肝胰腺两种组织中的酯酶(EST)
、 酸性磷酸酶 (ACP) 、碱性磷酸酶(ALP) 、 乳酸脱氢酶(LDH) 、
苹果酸脱氢酶(MDH) 、 苹果酸酶(ME) 、 乙醇脱氢酶
(ADH) 、 超氧化物歧化酶(SOD) 和谷氨酸脱氢酶(GDH)9
种同工酶的检测结果。多态位点比例(P)、
平均杂合度观察值(H 。)、预期杂合度(H
。)分别按式(4)、式(5)、式(6)计算:
P=N₁/n×100% (4)
式中:
P— 多态位点比例;
N₁— 多态位点数;
n—— 检测位点总数。
H 。=(∑H₁)/n ………………………… (5)
式中:
H。——平均杂合度观察值;
Hi— 多态位点杂合度观察值;
n—— 观察位点总和。
H.=[2(1-∑q²)]/n … …………… …… (6)
式中:
H。— 预期杂合度;
q— 纯合基因型的频率;
n—— 观察位点总和。
GB/T 26619—2011
对 虾 头 胸 甲 分 区 及 外 形
A.1 对虾头胸甲的分区
对虾头胸甲的分区见图 A.1。
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style="width:6.76675in;height:2.7255in" />
15 — — 眼眶刺; 29— 眼眶触角沟;
16— 眼 后 刺 ; 30 — — 肝刺;
17— 触角刺; 31 — — 颈脊;
18 — — 触角脊; 32 — — 胃上刺;
19 — — 鳃甲刺; 33 — — 颈沟;
20 — — 颊刺; 34— 肝 上 刺 ;
21 — — 眼眶触角沟; 35 — — 额角侧沟;
22 — — 肝刺; 36 — — 中央沟;
23 — — 肝沟; 37 — — 额角后脊;
24— 肝 脊 ; 38 — — 额角侧脊;
25 — — 肝上刺; 39 — — 触角刺;
26 — — 亚缘脊; 40 — — 眼眶刺;
27 — — 心鳃脊; 41 — — 眼后刺。
图 A.1 对虾头胸甲分区
GB/T 26619—2011
A.2 对虾外形
对虾外形(侧面)及体节、附肢情况见图 A.2。
style="width:9.75325in;height:5.7134in" />
图 A.2 对虾外形(侧面)
GB/T 26619—2011
(资料性附录)
不同日龄养殖斑节对虾体长、体重实测值
不同日龄养殖斑节对虾体长、体重实测值见表B.1。
表 B.1 不同日龄养殖斑节对虾体长、体重实测值
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GB/T 26619—2011
(规范性附录)
溶液的配制
C.1 0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH7.0) 的配制
1 mol/L磷酸氢二钾(K₂HPO,)61.5 mL,1 mol/L 磷酸二氢钾(KH₂PO)38.5
mL,用水稀释至
C.2 加样缓冲液的配制
0.25%溴酚蓝,0.25%二甲苯青 FF,30% 甘油水溶液,混合均匀后4℃保存。
C.3 TG 电泳缓冲液
C.3.1 储存液的配制
15.1g 三羟甲基氨基甲烷(Tris),94g 甘氨酸(电泳级)(pH8.3),50 mL
10%十二烷基磺酸钠
(SDS, 电泳级),定容到1000 mL。
C.3.2 使用液的配制
稀释储存液,使终浓度达到25 mol/L Tris,250 mmol/L甘氨酸,0.1% SDS。
更多内容 可以 GB-T 26619-2011 斑节对虾. 进一步学习