ICS 65.160 YC X 85 备案号：27779—2010 中华人民共和国烟草行业标准 YC/T332---2010 烟用水基胶 甲醛的测定 高效液相色谱法 Determination of formaldehyde in water-borne adhesives for cigarette- High performance liquid chromatographic method 2010-01-25发布 2010-02-01实施 发布 国家烟草专卖局 中华人民共和国烟草 行业标 准 烟用水基胶 甲醛的测定 高效液相色谱法 YC/T332—2010 * 中国标准出版社出版发行 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 网址www.spc.net.cn 电话：68523946 568517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 各地新华书店经销 * 开本880×1230 1/16 印张0.5 字数9千字 2010年7月第一版 2010年7月第一次印刷 * 书号：155066·2-20782 如有印装差错 告由本社发行中心调换 版权专有侵权必究 举报电话：（010)68533533 YC/T332—2010 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家烟草专卖局提出。 本标准由全国烟草标准化技术委员会烟用材料分技术委员会（SAC/TC144/SC8)归口。 本标准起草单位：中国烟草标准研究中心、湖南中烟工业有限责任公司、上海烟草（集团)公司、红云 红河烟草（集团）有限责任公司、国家烟草质量监督检验中心。 本标准主要起草人：戴云辉、蒋腊梅、吴名剑、陈连芳、韩云辉、吴达、唐纲岭、詹建波、夏建军、 廖头根、陈宸。 H YC/T332-2010 烟用水基胶甲醛的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了烟用水基胶中甲醛的测定方法一一高效液相色谱法。 本标准适用于烟用水基胶中甲醛的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 用水稀释萃取样品中的甲醛，通过2，4-二硝基苯肼衍生形成甲醛除后，用高效液相色谱仪/二极管 阵列检测器测定，外标法定量。 4试剂 除特别要求外，所用试剂均为分析纯，水应符合GB/T6682中一级水的要求。 4.1试剂 4.1.1乙腈（色谱纯）。 4.1.2磷酸（色谱纯，质量分数85%）。 4.1.32，4-二硝基苯肼（纯度大于97%）。 4.1.4衍生化试剂：称取0.1g的2,4-二硝基苯肼（4.1.3)于1000mL棕色容量瓶中，加人6mL磷酸 （4.1.2)，乙睛（4.1.1)定容。 4.1.5甲醛-2，4-二硝基苯踪（标准品，浓度1.0mg/mL，分子式：C,HsN,04，相对分子质量：210.15）。 4.2标准溶液 用移液枪准确移取0.5mL1.0mg/mL甲醛-2，4-二硝基苯（4.1.5）至50mL容量瓶中，乙腈 (4.1.1)定容，定为第1级标准溶液。 取第2级标准溶液20.00mL加入50mL容量瓶中，乙腈（4.1.1)定容，定为第3级标准溶液。 取第3级标准溶液20.00mL加入50mL容量瓶中，乙（4.1.1)定容，定为第4级标准溶液。 各级标准溶液浓度示例如表1，各级标准溶液浓度需根据标准品标定浓度具体计算。 标准溶液贮存于0℃～4℃条件下，有效期3个月。取用时放置于常温下，达到常温后方可使用。 1 YC/T332—2010 表1 工作标准溶液系列 系列标准溶液 2 3 5 9 甲醛腺浓度 4.000 1.600 0.640 0.256 0.102 10.000 mg/L 相当于甲醛浓度 1.429 0. 571 0.229 0.091 4 0.0366 0.014 6 mg/L 5材料与仪器 5.1高速离心机：转速12000r/min，可控制温度，配10mL离心管。 5.2振荡仪。 5.3微膜过滤器：配0.45μm有机微膜。 5.4液相色谱分析柱型号：Cl8反相色谱柱；规格：5um，4.6mm×150mm。 5.5.高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器。 5.6活塞式移液枪：1000μL。 5.7容量瓶：1000mL，50mL。 5.8移液管：20mL，25mL。 5.9 具塞三角瓶：50mL。 6 分析步骤 6.1 样品前处理 称取0.5g试样（精确至0.1mg）于50mL具塞三角瓶中，加人25.0mL水后置于振荡器上，振荡 萃取15min。准确移取5.0mL萃取液至离心管中，于20℃下离心20min，转速为12000r/min。静 置后，准确移取1.0mL上层清液于10mL容量瓶中，加入4mL衍生化试剂（4.1.4)后用乙睛（4.1.1) 定容，放置15min进行衍生化。然后用0.45μm有机滤膜过滤，滤液待高效液相色谱分析。 若待测试样溶液的浓度超出标准工作曲线浓度范围，则对样品前处理适当调整后重新测定。 6.2空白试验 不加样品，重复6.1步骤，进行HPLC分析。 6.3仪器条件 6.3.1柱温：30℃。 6.3.2 流速：0.5mL/min。 6.3.3 进样量：10μL。 6.3.4 检测波长：352.0nm。 6.3.5 流动相：A为水，B为乙腈（4.1.1)。 6.3.6 梯度洗脱程序：见表2。 表2 2梯度洗脱程序 时间 流动相A 流动相B % % min 0. 00 70 30 5, 00 10 06 15. 00 10 06 16.00 70 30 20,00 70 30 2 YC/T332—2010 6.4标准工作曲线绘制 分别取标准溶液（4.2)进行HPLC分析，根据标准溶液的浓度及甲醛响应峰面积，作甲醛的标准工 作曲线，工作曲线线性相关系数R²>0.99。 每次试验均应制作标准曲线，每20次样品测定后应加人一个中等浓度的标准溶液，如果测得的值 与原值相差超过3%，则应重新进行标准曲线的制作。 6.5样品测定 按照仪器测试条件测定样品（6.1），由保留时间定性，外标法定量；每个样品重复测定两次。同时每 批样品做一组空白。标准溶液和试样衍生液的色谱图参见附录A。 7结果的计算与表述 样品中甲醛的含量按式(1)进行计算： .(1) m 式中： X—试样中甲醛的含量,单位为毫克每千克(mg/kg)； c由标准曲线得出的甲醛浓度，单位为毫克每升（mg/L)； 一由标准曲线得出的空白值，单位为毫克每升（mg/L）； V—萃取液体积，单位为毫升(mL)； 一试料质量，单位为克（g）； m- S—试样溶液的稀释因子。 以两次平行测定的平均值为最终测定结果，精确至0.1mg/kg。 两次平行测量结果的相对平均偏差应小于10%。 8回收率、检出限和定量限 本方法的回收率、检出限和定量限结果见表3。 表3方法的回收率、检出限和定量限结果 回收率 检出限 定量限 化合物 % mg/kg mg/kg 甲醛 91.0~105.7 1. 6 5.3 9试验报告 试验报告应说明： 识别被测试样需要的所有信息； 参照本标准所使用的试验方法； 测定结果，包括各单次测定结果及其平均值； 与本标准规定的分析步骤的差异； 在试验中观察到的异常现象； 试验日期； 一测定人员。 YC/T332-2010 附录A （资料性附录） 色谱图示例 A.1标准溶液色谱图 标准溶液色谱图如图A.1所示。 20.16 0. 12 HCHO-DNPH 0. 08 J 0. 04 0. 00 2. 00 4. 00 6. 00 8. 00 10. 00 12. 00 14. 00 16. 00 18.00 20. 00 t/min 图A.1 标准溶液色谱图 A.2 试样衍生液色谱图 试样衍生液色谱图如图A.2所示。 ≥ 0.25 0. 20 0.15 0. 10 0. 05 0. 00 2.00 4. 00 6. 00 8.00 10. 00 12. 00 14. 00 16.00 18.00 20.00 t/min 图A.2 试样衍生液色谱图 版权专有侵权必究 书号：155066·2-20782 YC/T332-2010