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本文是学习GB-T 17815-2018 饲料中丙酸、丙酸盐的测定. 而整理的学习笔记,分享出来希望更多人受益,如果存在侵权请及时联系我们

1 范围

本标准规定了饲料中丙酸、丙酸盐的气相色谱和高效液相色谱测定方法。

本标准适用于丙酸含量在3000 mg/kg
以下的饲料原料、配合饲料、浓缩饲料中丙酸、丙酸盐(以丙

酸计)的测定。

本标准中的气相色谱法的检出限为30 mg/kg, 定量限为100 mg/kg;
高效液相色谱法的检出限为

30 mg/kg,定量限为100 mg/kg。

2 规范性引用文件

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GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

GB/T 14699.1 饲料采样

GB/T 20195 动物饲料试样的制备

3 气相色谱法(仲裁法)

3.1 原理

试样中的丙酸、丙酸盐经磷酸酸化，丙酸盐转化为丙酸，水蒸气蒸馏将丙酸与基质分离，馏出液中的

丙酸经气相色谱仪氢火焰离子化检测器检测，外标法定量。

3.2 试剂或材料

除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂。

3.2.1 水，GB/T 6682,一级。

3.2.2 磷酸：优级纯。

3.2.3 氯化钠

3.2.4 石英砂。

3.2.5 硅油。

3.2.6 磷酸溶液(1+1):量取50 mL 磷酸用水稀释至100 mL, 混匀。

3.2.7 甲酸溶液(2+98):移取2 mL 甲酸用水稀释至100 mL, 混匀。

3.2.8 丙酸标准贮备溶液：准确称取1.0310 g 丙酸(C₃H₆O₂ , 纯度≥97%)于100 mL
容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀。此液1 mL 含 1 0 mg
丙酸，此溶液在4℃可保存30 d。

3.2.9 丙酸标准工作溶液：移取丙酸标准贮备溶液(3.2.8)10.0 mL 置于100
mL 容量瓶中，用水稀释定容。此液1 mL 含 1 mg 丙酸，临用现配。

3.2.10 0.45 μm 滤膜。

3.3 仪器设备

3.3.1 气相色谱仪：带氢火焰离子化检测器。

GB/T 17815—2018

3.3.2 水蒸气蒸馏装置：具500 mL 蒸馏烧瓶。

3.3.3 分析天平：感量0.0001 g 和0. 1 g。

3.4 样品

按 GB/T 14699.1 采样，按GB/T 20195 制备试样，粉碎后过0.42 mm
孔径的分析筛，混匀后装入

密闭容器中备用。

3.5 试验步骤

3.5.1 试样溶液的制备

平行做两份试验，准确称取50 g 试样(精确至0. 1 g) 置于500 mL
的蒸馏瓶中，迅速加入200 mL 水，80g 氯化钠(3.2.3),10 mL
磷酸溶液(3.2.6),10g 石英砂(3.2.4)及2～3滴硅油(3.2.5),立即进行水
蒸气蒸馏，将250 mL
容量瓶置于冰水浴中作为吸收液装置，蒸馏直至馏出液接近240 mL 时停止。将
容量瓶室温下放置30 min, 加1.0 mL
甲酸溶液(3.2.7),用水定容。充分摇匀后用0.45μm 的滤膜过滤

待测。

3.5.2 标准系列溶液的制备

准确移取丙酸标准工作溶液(3.2.9)2.5 mL 、5.0
mL,丙酸标准贮备溶液(3.2.8)1.0 mL 、2.5 mL、 5.0 mL 、10.0mL 置于500 mL
蒸馏瓶中，迅速加入200 mL 水，80 g 氯化钠(3.2.3),10 mL 磷酸溶液
(3.2.6),立即进行水蒸气蒸馏，将250 mL
容量瓶置于冰水浴中作为吸收液装置，蒸馏直至馏出液接近 240mL
时停止。将容量瓶在室温下放置30 min, 加1 . 0 mL
甲酸溶液(3.2.7),用水定容，摇匀后用 0.45μm
的滤膜过滤，其丙酸标准溶液最终浓度分别为10 .0 μg/mL、20.0 μg/mL、40.0
μg/mL、

100.0 μg/mL 、200.0 μg/mL 、400.0 μg/mL。

3.5.3 参考气相色谱条件

色谱柱：聚乙二醇(PEG) 石英毛细管柱，柱长30 m, 内径0.25 mm, 膜厚度0 . 5
μm 或等同性能色

谱柱。

载气：氮气，纯度>99.99%。

载气流速：1.0 mL/min。

进样口温度：250℃。

分流比：5:1。

检测器温度：250℃。

柱温箱温度：110℃保持5 min, 然后以10℃/min 的速率升到180℃,保持5 min。

进样量：1 μL。

3.5.4 测定

在上述气相色谱条件下，将丙酸标准系列溶液及试样液注入气相色谱仪测定，采用单点或多点校

正，外标法定量。标准溶液色谱图参见附录 A 中的图 A. 1。

3.6 试验数据处理

丙酸含量以质量分数 wi 计，数值以毫克每千克(mg/kg) 表示，按式(1)计算：

style="width:1.43346in;height:0.61336in" /> (1)

GB/T 17815—2018

式中：

c—— 丙酸标准溶液中丙酸浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);

V— 蒸馏液的体积，单位为毫升(mL);

m— 试样质量，单位为克(g)。

测定结果用平行测定结果算术平均值表示，计算结果保留三位有效数字。

丙酸盐含量以丙酸计。

3.7 精密度

在重复性条件下获得的两次独立测试结果与其算术平均值的绝对差值不大于该平均值的15%。

4 高效液相色谱法

4.1 原理

试样中的丙酸、丙酸盐经磷酸酸化，水蒸气蒸馏(丙酸盐转化为丙酸)与基质分离，馏出液经液相色

谱仪紫外检测器检测，外标法定量。

4.2 试剂或材料

除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂。

4.2.1 水，GB/T 6682,一级。

4.2.2 磷酸：优级纯。

4.2.3 乙腈：色谱纯。

4.2.4 硅油。

4.2.5 氯化钠。

4.2.6 石英砂。

4.2.7 磷酸溶液(1+1):量取50 mL 磷酸用水稀释至100 mL, 混匀。

4.2.8 甲酸溶液(2+98):移取2 mL 甲酸用水稀释至100 mL, 混匀。

4.2.9 磷酸氢二铵缓冲液(pH=3.0): 称取1.5 g
磷酸氢二铵，加水溶解并定容至1000 mL, 用磷酸溶液(4.2.7)调节 pH
值3.0左右，临用现配。

4.2.10 丙酸标准贮备溶液：准确称取1.0310 g 丙酸(C₃H₆O₂ ,
纯度≥97%)于100 mL 容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀。此液1 mL 含 1 0 mg
丙酸，此溶液在4℃可保存30 d。

4.2.11 丙酸标准工作溶液：移取丙酸标准贮备溶液(4.2.10)溶液10.0 mL
置于100 mL 容量瓶中，用水稀释定容。此液1 mL 含 1 mg 丙酸，临用现配。

4.2.12 0.45μm 滤膜。

4.3 仪器设备

4.3.1 高效液相色谱仪：配紫外检测器。

4.3.2 水蒸气蒸馏装置：具500 mL 蒸馏烧瓶。

4.3.3 分析天平：感量0.0001 g 和0.1 g。

4.3.4 pH 计。

4.4 样品

按 GB/T 14699.1 采样，按 GB/T 20195 制备试样，粉碎后过0.42 mm
孔径的分析筛，混匀后装入

密闭容器中备用。

GB/T 17815—2018

4.5 试验步骤

4.5.1 试样溶液的制备

同3.5.1。

4.5.2 标准系列溶液的制备

同3.5.2。

4.5.3 参考液相色谱条件

色谱柱：Cis 柱，柱长250 mm, 内径4.6 mm, 粒径 5 μm 或等效色谱柱；

流动相：量取磷酸氢二铵缓冲液(4.2.9)980 mL, 加入乙腈(4.2.3)20mL, 混匀。

流速：1.0 mL/min;

柱温：30℃;

波长：214 nm;

进样量：10 μL～20μL。

4.5.4 测定

在上述液相色谱条件下，将丙酸标准系列溶液及试样液注入液相色谱仪测定，采用单点或多点校

正，外标法定量。标准溶液色谱图参见图 A.2。

4.6 试验数据处理

丙酸含量以质量分数w2 计，数值以毫克每千克(mg/kg) 表示，按式(2)计算：

style="width:1.41993in;height:0.61996in" /> (2)

式中：